Ανασχεδιασμός
της δομής ενζύμων
|
|||||||
|
Ο ανασχεδιασμός και η τροποποίηση της δομής ενζύμων πραγματοποιείται
συνήθως με εφαρμογή της τεχνολογίας του ανασυνδυασμένου DNA. Η κατευθυνόμενη μεταλλαξογένεση
παρέχει τη δυνατότητα τροποποιήσεως του ενζυμικού μορίου, αντικαθιστώντας
συγκεκριμένα αμινοξέα με άλλα [B7-B10]. Αυτό
επιτυγχάνεται εμμέσως, με αντικατάσταση των αντίστοιχων βάσεων του γονιδίου
το οποίο κωδικεύει το συγκεκριμένο ένζυμο. Τροποποιήσεις του ενζυμικού μορίου
είναι δυνατόν να πραγματοποιηθούν και σε μεγαλύτερη έκταση, με αποκοπή και
αντικατάσταση ολόκληρης αλληλουχίας βάσεων στο γονίδιο το οποίο κωδικεύει το
συγκεκριμένο ένζυμο. Πρόσφατα, η μεθοδολογία της ‘κατευθυνόμενης εξέλιξης’
(directed evolution) δίνει τη δυνατότητα δραστικότερων
τροποποιήσεων του ενζυμικού μορίου, μέσω τυχαίας in vitro επανασυναρμολόγησης τμημάτων του DNA (DNA suffling) το οποίο κωδικεύει την ίδια ή
διαφορετικές πρωτεΐνες, με σκοπό την δημιουργία βιβλιοθήκης χιμαιρικών μορφών της πρωτεΐνης.
Από τις βιβλιοθήκες αυτές επιλέγεται εκείνη(ες) η μορφή(ες) του ενζύμου που
ικανοποιεί τις απαιτήσεις μας. |
|
||||||
